Medio de cultivo Nitsh
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Medio de cultivo de Nitsch y Nitsch (NN): Fue formulado por Nitsch y Nitsh en 1969 para el cultivo de granos de polen de tabaco. Contiene mayor concentración de sacarosa (5%) como fuente de hidrato de carbono. Este medio de cultivo posee menores concentraciones de sales minerales que el medio propuesto por Murashige y Skoog (1962), que es el más universalmente utilizado en el cultivo de células y tejidos.
Componentes del medio de cultivo
Macronutrientes | miligramos/litro |
---|---|
NH4NO3 | 720,00 |
KNO3 | 950,00 |
MgSO4 | 90,27 |
CaCl2.aq | 166,00 |
KH2PO4 | 68,00 |
Micronutrientes | |
CuSO4.5H2O | 0,025 |
FeNa.EDTA | 36,70 |
H3BO3 | 10,0 |
MnSO4.H2O | 18,94 |
Na2MoO4.2H2O | 0,25 |
ZnSO4.7H2O | 10,00 |
Vitaminas | |
Biotina | 0,05 |
Acido Fólico | 1 |
Piridoxina | 0,50 |
Glicina | 2,00 |
Myo-Inositol | 100,00 |
Piridoxina - HCl | 0,50 |
Tiamina HCl | 0,50 |
El medio de Nitsch es esencialmente una modificación de la solución de Knop, una de las primeras soluciones en el cultivo hidropónico (cerca de 1865).
Los microelementos, vitaminas y hormonas se pueden preparar en una solución madre y ser añadidas antes de su uso.
Aplicación
Este medio de cultivo fue útil en el cultivo de partes de flores de tomate; la concentración de sacarosa utilizada era de 5% en lugar de 2% ó 3% utilizado en muchos otros medios. Más tarde el medio definido por Nitsch se utilizó en la producción de plantas haploides de varias especies de Nicotiana obtenidos a partir de granos de polen. En este procedimiento, el polen en estado uninucleado se aísla y después se cultiva in vitro. Los granos de polen proliferan en estructuras tipo embrión que se desarrollan en etapas similares a las de los embriones cigóticos.
Firmas comercializadoras
Existen varias firmas comercializadoras de este producto, catálogos como Plant Cell and Tissue Culture Phytopathology Biochemicals perteneciente a Duchefa® y Technical Data de Plantigen Humedia, a través de las cuales se puede adquirir las formulaciones completas del medio de cultivo NN.
Fuentes
- Nitsch J.P. and Nitsch C. 1969. Haploid plants from pollen grains, Science 169, 85.
- Nitsch J.P. 1969. Experimental androgenesis in Nicotiana, Phytomorphology 19, 389.
- Plant Cell and Tissue Culture Phytopathology Biochemicals. DUCHEFA BIOECHEMIE B.V. Catalogue 2010-2012.